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細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是一項(xiàng)基礎(chǔ)但十分重要的技術(shù)。幫助科研人員再生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)探索生物學(xué)機(jī)理、藥物篩選、開(kāi)發(fā)治療方法等目的，并為基礎(chǔ)科學(xué)和臨床應(yīng)用提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)，幫助于我們更深入地了解生命過(guò)程，推動(dòng)醫(yī)學(xué)和生物科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步。
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，除了可靠的實(shí)驗(yàn)方案、嚴(yán)格無(wú)菌的環(huán)境以及規(guī)范合理的實(shí)驗(yàn)操作，還有一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，重要但容易被忽視——高品質(zhì)的實(shí)驗(yàn)試劑。“巧婦難為無(wú)米之炊"，實(shí)驗(yàn)試劑選擇的好與壞，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的成敗。其中，胎牛血清作為“細(xì)胞糧食"的主要提供者，在細(xì)胞培養(yǎng)中扮演著重要的角色。
胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物；提供結(jié)合蛋白，來(lái)識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用；參與細(xì)胞貼壁；提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害；參與細(xì)胞凍存。
因此細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要挑選高品質(zhì)的胎牛血清，來(lái)保障實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行。在選擇胎牛血清時(shí)，有以下幾個(gè)注意事項(xiàng)：
1、胎牛血清的內(nèi)毒素含量
在挑選血清時(shí)，應(yīng)關(guān)注內(nèi)毒素含量的高低。內(nèi)毒素含量高，容易引起細(xì)胞衰老、凋亡等情況，品質(zhì)高的的胎牛血清，內(nèi)毒素應(yīng)該是非常低的。因此，內(nèi)毒素可作為胎牛血清等級(jí)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)之一，內(nèi)毒素含量越低的胎牛血清，級(jí)別就越高：
內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，為特級(jí)胎牛血清；
內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，為優(yōu)級(jí)胎牛血清；
內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清。
目前，由于同一廠家，不同批次的血清，內(nèi)毒素?cái)?shù)值也可能有較大差異，因此很多血清廠家在名稱上已不注明級(jí)別。但使用者仍可通過(guò)檢測(cè)報(bào)告，自行甄別挑選。
2、胎牛血清的血源
澳洲作為無(wú)疫產(chǎn)區(qū)，環(huán)境更為純凈，抗生素等藥物的使用管理也較為嚴(yán)格，因此，澳洲血源的胎牛血清，更受科研人員的偏愛(ài)。
合格的胎牛血清通常來(lái)自符合當(dāng)?shù)匦竽敛块T(mén)相關(guān)規(guī)定的的養(yǎng)殖場(chǎng)和屠宰場(chǎng)，采用非侵入性或較小侵入性的采集方法。這樣可以盡可能維持血源的潔凈度，減少外部污染物的影響。
3、胎牛血清應(yīng)通過(guò)病原相關(guān)檢測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)的成功與安全性密切相關(guān)，而工藝精良的胎牛血清生產(chǎn)技術(shù)，可以在生產(chǎn)層面，避免胎牛血清被各類病原微生物污染。在選擇胎牛血清時(shí)，科研人員往往無(wú)法直接進(jìn)入生產(chǎn)廠家，了解具體的生產(chǎn)過(guò)程，因此，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注檢測(cè)報(bào)告中的“無(wú)菌檢測(cè)"、“病毒檢測(cè)"“病毒抗體"等相關(guān)項(xiàng)目，選擇無(wú)病原污染的的胎牛血清。
以科研人員常用的，Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清為例。該品牌的胎牛血清為澳洲血源，生產(chǎn)過(guò)程經(jīng)過(guò)7次無(wú)菌過(guò)濾，最后3次為0.1μm濾膜無(wú)菌過(guò)濾。
為了最終驗(yàn)證胎牛血清的無(wú)菌性，Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清還經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的病原體檢測(cè)，在供應(yīng)商提供的檢測(cè)報(bào)告中，涉及有關(guān)病毒、細(xì)菌、真菌和支原體等，病原體和微生物的篩查檢測(cè)項(xiàng)目，檢測(cè)結(jié)果均為“未檢出"，相應(yīng)病毒的抗體檢測(cè)各類蛋白也應(yīng)呈現(xiàn)“未檢出"的結(jié)果，確保胎牛血清的無(wú)菌性。另外，Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清的內(nèi)毒素含量也非常低，控制在3EU/ml以下，有些批次甚至 ≤ 1EU/mL，讓細(xì)胞更加健康地生長(zhǎng)繁殖。
4、胎牛血清的蛋白含量
總蛋白含量：胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，可能說(shuō)明采血的牛齡偏大，不是胎牛；數(shù)值偏低，表明血清可能摻入水或者其他溶劑。
血紅蛋白含量：標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl。
免疫球蛋白：免疫球蛋白的數(shù)值能側(cè)面反映出采血的時(shí)的牛齡情況，新生牛血清中容易檢出IgM，IgG的含量也偏高，胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。
需要注意的是，在檢測(cè)規(guī)范允許的范圍內(nèi)，同一品牌，不同批次的胎牛血清，各類蛋白含量可能略有差異，如果實(shí)驗(yàn)中，對(duì)某些蛋白有特殊的需求，需要關(guān)注胎牛血清的檢測(cè)報(bào)告，對(duì)不同批次的血清進(jìn)行選擇。
因此盡量選擇能提供多批次平行試用的品牌，經(jīng)過(guò)對(duì)比篩選，Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清脫穎而出。同時(shí)儲(chǔ)備多個(gè)批次，供使用人員試用，選擇更適合自身實(shí)驗(yàn)需求的胎牛血清，試用結(jié)果滿意再進(jìn)行大批量訂購(gòu)，更加省時(shí)省力省心。
綜上所述，在選擇胎牛血清時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注胎牛血清的內(nèi)毒素含量、血源、無(wú)菌及病原檢測(cè)、蛋白含量等指標(biāo)，選擇更適合自身細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)品。
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