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CRISPR技術(shù)是近些年來(lái)風(fēng)靡生物界的前沿基因編輯技術(shù)。CRISPR技術(shù)經(jīng)常需要在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行，因此，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是此類(lèi)研究的基礎(chǔ)。對(duì)于常見(jiàn)且培養(yǎng)難度相對(duì)較低的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，新生牛血清足以滿足需求。Ausbian進(jìn)口新生牛血清，營(yíng)養(yǎng)豐富，內(nèi)毒素含量低，冷鏈運(yùn)輸，可以滿足常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)的要求。
γδ T細(xì)胞是有效的抗癌效應(yīng)物，具有廣泛靶向腫瘤的潛力，獨(dú)立于患者特異性新抗原或人白細(xì)胞抗原背景。γδ T細(xì)胞可以感知轉(zhuǎn)化細(xì)胞中普遍存在的保守細(xì)胞應(yīng)激信號(hào)2，盡管靶向應(yīng)激靶細(xì)胞的機(jī)制尚不清楚。
v - γ - 9v - δ2 T細(xì)胞是人類(lèi)γ - δ T細(xì)胞中豐富的子集，它識(shí)別含有親丁酸蛋白2A1 (BTN2A1)和BTN3A1(參考文獻(xiàn))的蛋白復(fù)合物。一種廣泛表達(dá)的細(xì)胞表面蛋白，被腫瘤細(xì)胞大量產(chǎn)生的磷酸抗原激活。
近日，研究人員在靶癌細(xì)胞中結(jié)合全基因組CRISPR篩選來(lái)鑒定調(diào)節(jié)γδ T細(xì)胞殺傷和BTN3A細(xì)胞表面表達(dá)的途徑。篩選結(jié)果顯示，細(xì)胞表面BTN3A豐度的多層調(diào)控以及通過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯后修飾和膜運(yùn)輸觸發(fā)γδ T細(xì)胞。
相關(guān)研究發(fā)表在《Nature》上，文章標(biāo)題為：“CRISPR screens decode cancer cell pathways that trigger γδ T cell detection"。
此外，各種遺傳擾動(dòng)和抑制劑破壞了癌細(xì)胞的代謝途徑，特別是atp產(chǎn)生過(guò)程，被發(fā)現(xiàn)改變了BTN3A水平。代謝危機(jī)期間BTN3A和BTN2A1的誘導(dǎo)依賴于amp活化蛋白激酶(AMPK)。最后，在細(xì)胞系模型和患者來(lái)源的腫瘤類(lèi)器官中，AMPK的小分子激活導(dǎo)致BTN2A1-BTN3A復(fù)合物的表達(dá)增加，并增加v γ γ 9v δ2 T細(xì)胞受體介導(dǎo)的殺傷。這種代謝應(yīng)激誘導(dǎo)配體上調(diào)的ampk依賴性機(jī)制加深了對(duì)γδ T細(xì)胞應(yīng)激監(jiān)測(cè)的理解，并為增強(qiáng)γδ T細(xì)胞抗癌活性提供了新的途徑。
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