RNA提取試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因組，不適合于細胞等組織內RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組RNA可用于RT-PCR實驗。
RNA提取試劑盒操作步驟
使用前請先在漂洗液中加入一瓶新開啟的無水乙醇，加入到離瓶口約0.5-1cm距離，蓋好搖勻。所有離心步驟均在2-8條件下進行。
1、取病毒上清液0.5ml，12000rpm離心5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀（如無沉淀可省去此步）。
2、向病毒上清中加入20ul10mg/ml的蛋白酶K，充分混勻，65消化10min，期間可顛倒離心管混勻數次。
3、吸附柱前處理：從包裝中取出吸附柱，放入收集管中，加入700ul洗柱液，室溫放置2分鐘，2-812000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中待用。
4、向病毒上清中加入500ul結合液，充分混勻。再向管中加入400ul無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，不影響RNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置2min。（吸附柱的最大容積為750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。）
5、12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
8、12000rpm離心2min，將吸附柱置于室溫或50溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。
9、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經65水浴預熱的RNasefreeddH2O，室溫放置5min，12000rpm離心2min。即可得到高質量的病毒基因組RNA。
400-166-8600
當前位置：