透析胎牛血清做滅活處理，應該怎么處理呢
更新時間：2021-12-27 | 點擊率：1138
將該病毒的F蛋白（融合蛋白）序列克隆入質粒內，并轉染293T細胞。轉染后第20小時，細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+
透析胎牛血清中培養了45分鐘（讓細胞處于饑餓狀態，因培養基中缺少氨基酸），再在同樣上述培養基中培養，但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。
培養4小時后進行分析。即裂解細胞后，用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯影，分析F蛋白的表達情況。發現F蛋白的表達確實增加了，但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結果證實，野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。
值得指出的是，用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標記細胞內的蛋白，結合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發生的某一蛋白的變化，從而發現該蛋白所扮演的角色，的確是一個普遍有效的方法（在研究信號分子磷酸化的方面，則需要使用32P標記的磷酸鹽）。
透析胎牛血清是否需要做滅活處理？這取決于您的應用。
滅活過程中，會導致血清中某些成分被破壞，如氨基酸，維生素，生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時，才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感，需要去除該組分。常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白，因為補體在機體中參與細胞殺傷，巨噬細胞和淋巴細胞活化，肥大細胞和血小板組胺釋放，平滑肌收縮等過程，所以一般在免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞的培養過程中需要對血清進行滅活處理。
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