一、核心應(yīng)用場景
細(xì)胞培養(yǎng)污染防控
科研實(shí)驗(yàn)室：檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中支原體污染，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性。適用于細(xì)胞治療、藥物篩選、基因編輯等研究場景。
生物制藥企業(yè)：用于疫苗、抗體、細(xì)胞治療產(chǎn)品等生物制品的質(zhì)量控制，符合藥典要求（如歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)），確保生產(chǎn)放行檢測的合規(guī)性。
臨床診斷與病原監(jiān)測
快速檢測：通過PCR或等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)直接檢測臨床樣本（如痰液、血液、宮頸分泌物）中的支原體DNA，輔助感染性疾病（如呼吸道、生殖系統(tǒng)感染）的早期診斷。
動(dòng)態(tài)監(jiān)測：在雞群、畜群等養(yǎng)殖場景中，通過腭裂拭子、血清等樣本監(jiān)測支原體（如雞滑液囊支原體）的感染情況，制定防控計(jì)劃。
科研與基礎(chǔ)研究
基因表達(dá)分析：提取高純度支原體DNA用于基因組測序、轉(zhuǎn)錄組分析，研究病毒-宿主互作機(jī)制。
抗性品種篩選：結(jié)合田間病毒檢測數(shù)據(jù)，評估不同品種的抗病性，推動(dòng)抗病育種進(jìn)程。
二、標(biāo)準(zhǔn)操作方法
樣本預(yù)處理
細(xì)胞培養(yǎng)物：離心收集上清或菌體沉淀，去除宿主細(xì)胞碎片（如0.22μm濾膜過濾），濃縮支原體至500μl以內(nèi)。
臨床樣本：直接取上清或經(jīng)離心、洗滌后處理，避免蛋白質(zhì)、多糖等干擾物殘留。
DNA提取步驟（以磁珠法試劑盒為例）
裂解與消化：加入裂解液（含SDS、蛋白酶K）和NaCl，72℃水浴15分鐘，降解蛋白質(zhì)并釋放DNA。
磁珠結(jié)合：加入磁珠懸浮液，通過漩渦振蕩使DNA結(jié)合至磁珠表面，經(jīng)磁性分離架分離磁珠與雜質(zhì)。
洗滌與純化：用洗滌液A/B去除殘留蛋白質(zhì)、鹽分，乙醇干燥后，加入洗脫液70℃孵育7分鐘，離心收集純化DNA。
質(zhì)量檢測：通過分光光度計(jì)測定A260/A280比值（理想值1.8-2.0），瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證DNA完整性。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)
污染防控：全程在生物安全柜操作，使用無菌耗材，避免交叉污染；反應(yīng)后避免開蓋，防止氣溶膠污染。
溫度控制：裂解、洗脫步驟需嚴(yán)格溫控（如72℃、70℃），確保酶活性與DNA穩(wěn)定性。
試劑兼容性：不同批號試劑不可混用，乙醇需使用無水乙醇，避免影響核酸產(chǎn)量。
三、技術(shù)優(yōu)勢與選擇建議
高靈敏度與特異性：可檢測低至10CFU/mL的支原體DNA，避免假陽性/陰性結(jié)果。
快速高效：磁珠法試劑盒可在30分鐘內(nèi)完成提取，配合qPCR或等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)實(shí)現(xiàn)1-2小時(shí)快速檢測。
合規(guī)性保障：選擇通過ISO13485認(rèn)證的試劑盒（如德國MB公司Venor®GeM），符合藥典與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，確保檢測結(jié)果法律認(rèn)可。
400-166-8600
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