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細菌污染是生物實驗室，在培養(yǎng)細胞的過程，常見的問題之一，會直接引起細胞死亡，影響實驗進度。本期內(nèi)容，我們匯總了細菌污染的癥狀，并分別給出了應(yīng)對方法。
細菌是一種原核細胞微生物，一般為微米級別。細胞培養(yǎng)過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌、假單胞菌等。
細胞發(fā)生細菌污染后，有哪些癥狀？與其他污染相比，細菌污染在細胞培養(yǎng)過程中“發(fā)病"更為迅速，較容易被發(fā)現(xiàn)。具體表現(xiàn)為：
細胞培養(yǎng)液短期內(nèi)變黃且渾濁（大量酸性物質(zhì)累積）；
靜置的培養(yǎng)液時不渾濁，但稍加震蕩，就有許多渾濁物漂起；
可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒物漂浮；
細胞停止生長并有中毒表現(xiàn)，后出現(xiàn)大量死亡；
如何用實驗來驗證，細胞是否被細菌污染？常見的染色法、培養(yǎng)法以及PCR方法都可以對細菌污染進行檢測。
如果只需要初步判定細胞是否被污染，課選擇涂片染色或培養(yǎng)法對樣品進行檢測。
例如：革蘭氏染色法會使陽性菌呈現(xiàn)紫色，陰性菌呈現(xiàn)紅色；向肉湯培養(yǎng)基內(nèi)滴入少量培養(yǎng)液，37 ℃培養(yǎng)，培養(yǎng)基變渾濁；專業(yè)的PCR檢測：以Minerva Biolabs公司的細菌PCR檢測試劑盒（Onar® Bacteria Detection Kit，貨號：12-1025）為例：
該試劑盒采用PCR方法，用于檢測生物樣品（包括細胞培養(yǎng)物和病毒貯存液）中是否存在細菌。根據(jù)序列分析，該試劑盒可檢測超過45種細菌屬，其中含污染細胞的常見菌屬：
如果細胞不幸遭遇到了細菌污染的侵襲，該如何應(yīng)對呢？對于常規(guī)細胞培養(yǎng)物而言，發(fā)生細菌污染，建議直接將培養(yǎng)物丟棄，并對環(huán)境進行消殺，紫外線滅菌、消毒液擦拭培養(yǎng)箱、工作臺等。
對于重要且污染相對較輕的細胞：一般用抗生素的常用量的 5-10 倍作沖擊療法，用藥 24-48 小時后再換常規(guī)培養(yǎng)液，但需要需要注意的是：一旦發(fā)生污染后再使用抗生素常常難以清除干凈，有的抗生素只有抑菌作用而無殺菌效應(yīng)。且有研究表明，大量使用抗生素，或?qū)毎蚪M產(chǎn)生影響，該種處理方法屬于“殺敵一千，自損八百"，因此不做推薦。
因此，防范大于治療，在細胞實驗過程中，我們不希望看到任何微生物污染的情況發(fā)生。為了避免浪費有限的精力和經(jīng)費，應(yīng)優(yōu)先預(yù)防污染的發(fā)生。實驗前穿戴好防護用具，既是保護自己，也是保護實驗材料；定期對實驗環(huán)境進行清潔消毒，也能有效預(yù)防微生物污染的發(fā)生。
使用專業(yè)的支原體祛除試劑，更加高效、安全和便捷。實驗空間中的墻壁、實驗臺、桌椅板凳、顯微鏡、冰箱、離心機等設(shè)備和儀器，可使用Mycoplasma-off™或Mycoplasma-off™ Wipes對其進行噴涂或擦拭，清除表面的多種微生物污染。對于水浴鍋、培養(yǎng)箱水槽等環(huán)境，可以選擇Water Shield™對其進行處理。講產(chǎn)品按比例直接加入水浴鍋或培養(yǎng)箱水槽中，可預(yù)防微生物污染。
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