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許多解決重大疾病的研究，都是以細(xì)胞生物學(xué)為基礎(chǔ)的。而細(xì)胞生物學(xué)研究的重要手段之一，就是細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)。可以這樣說，沒有細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，就沒有如今的細(xì)胞生物學(xué)。
細(xì)胞培養(yǎng)指在人工創(chuàng)造的與體內(nèi)環(huán)境相似的體外條件下，比如適宜的溫度、pH，以及一定的營(yíng)養(yǎng)成分，使細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種技術(shù)。不同細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，在操作上會(huì)有些許不同，需要根據(jù)細(xì)胞類型與實(shí)驗(yàn)?zāi)康模骱线m的培養(yǎng)條件。
但原則上講，需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：
一、嚴(yán)格的無菌環(huán)境
實(shí)驗(yàn)環(huán)境的污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大忌。細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的污染，都會(huì)造成細(xì)胞出現(xiàn)凋亡、裂解等狀況，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。可以用消毒液體對(duì)實(shí)驗(yàn)室的墻壁、地面以及桌椅板凳進(jìn)行噴灑和擦拭，一定時(shí)長(zhǎng)的紫外線照射，都有不錯(cuò)的效果。
選擇污染清除試劑，如德國(guó)MB公司的Mycoplasma-off，對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面實(shí)驗(yàn)儀器等進(jìn)行噴灑和擦拭，有效預(yù)防各類污染。
對(duì)于培養(yǎng)箱水槽、恒溫水浴鍋，這類衛(wèi)生死角，可定期更換無菌水，并在水中添加德國(guó)MB公司的Water Shield，也能起到預(yù)防作用。
二、選擇優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)試劑
細(xì)胞用的培養(yǎng)試劑多選用分析級(jí)別的試劑。其中，胎牛血清的選擇很重要。劣質(zhì)的胎牛血清不但有污染細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)，而且還會(huì)因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)成分的缺乏，改變細(xì)胞狀態(tài)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
優(yōu)質(zhì)的胎牛血清，采自5-8月齡牛胚胎，富含各類細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)成分，在出廠前均應(yīng)通過質(zhì)量檢測(cè)，出具《檢測(cè)報(bào)告》。
締一生物的Ausbian進(jìn)口胎牛血清，選擇內(nèi)毒素更低的批次，內(nèi)毒素≤3EU/ml，降低內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞的影響，運(yùn)輸全程冷鏈，避免反復(fù)凍融，每批次附有檢測(cè)報(bào)告。
三、正確的實(shí)驗(yàn)操作
在進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)，要嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意實(shí)驗(yàn)儀器的規(guī)范用法與無菌操作，避免因?qū)嶒?yàn)操作而帶來的額外污染。
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