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一、產品用途：
新guan病毒RT-qPCR引物/探針(套裝)(英文名：SARS-CoV-2 Confirm)，用于定性檢測和分析新guan病毒RNA。它僅用于研究，不用于臨床診斷。
品名貨號/規格存儲
新guan病毒RT-qPCR引物/探針(套裝)
英文名：SARS-CoV-2 Confirm
品牌：德國MB公司(Minerva Biolabs)271-2100
100個反應/盒2-8℃避光。
凍干粉復溶后在-18℃以下保存
二、產品描述：
1. 該產品包括三個小管：
①橙蓋： 2019-n CoV Mix(凍干粉)，1管。
此管為新guan病毒引物/探針，可特異性擴增新guan病毒的RdRp基因(即RNA依賴性RNA聚合酶基因)，而其他冠狀病毒RNA不會被檢測到【1】【2】。(該引物/探針依據WHO診斷參考實驗室公布的新guan病毒引物/探針序 列而設計【1】。更多詳情可訪問：
如要檢測其他冠狀病毒，推薦MB公司提供的其他冠狀病毒引物/探針，品名：CoV Screen (without ConviFlex™RT-Taq Mix)，貨號：271-1100。
②綠蓋：Positive Control RNA(陽性對照RNA，凍干粉)，1管。
此陽性對照RNA為一段合成的RNA序列(序列來自武漢的病毒株)。
③白蓋：PCR Grade Water(液體)，1管。
2.使用前，①橙蓋和②綠蓋先用PCR級水(③白蓋)復溶，并分裝，避免反復凍融。
3.該引物/探針應與MB公司提供的【RNA病毒檢測試劑盒】(英文名：ConviFlex™RT-Taq Mix,貨號192-0025/-0100/-0250)一起使用，用于新guan病毒RT-qPCR反應檢測。
4.檢測樣本需為抽提過的RNA樣本。
5.新guan病毒的靶基因RdRp是用FAM™通道檢測，擴增的人RNA酶P基因(過程對照)用ROX™通道檢測，用以評估樣本的制備質量。
三、產品特點：
1. 靶點特別。依據WHO國際標準，此引物探針為新guan病毒RdRp基因，而非市面上常見的ORF1ab和N基因或E基因。
2.陽性對照RNA為一段合成的RNA序列。
3. 主要組分為凍干粉，4℃保存，儲存運輸方便，性能穩定。
4. 適用于科研中，各種來源的RNA樣本，包括拭子、活檢組織、哺乳動物細胞和細菌等。
四、需用戶自己準備的試劑耗材和儀器：
1. RNA病毒檢測試劑盒(RT-qPCR法)(英文名：ConviFlex™ RT-Taq Mix，貨號192-0025/-0100/-0250)
2. 熒光定量PCR儀(qPCR儀)
3. 無DNase和RNase的qPCR反應管
4. 離心機
5. 移液器及帶濾芯吸頭(不含DNase和RNase)
6. 用戶自己提取的RNA或現成的RNA樣品。(抽提過程建議使用商品化的RNA提取試劑盒完成，如MB廠家的：【病毒RNA提取試劑盒】(ExtractNow™ Virus RNA Kit，貨號611-1010/-1050/-1250)或【病毒RNA拭子提取試劑盒】(ExtractNow™ Virus RNA Swab Kit，貨號611-2250)。
五、操作注意事項：
1. 該引物/探針應僅由經過培訓的實驗室人員使用。
2. 始終穿上合適的防護服和戴一次性手套。
3. 根據樣品類型，應謹慎處理所有樣品。
4. 請遵循WHO推薦的方法處理樣本。
5. 該試劑盒不含有害物質。殘余物可以根據當地法規丟棄。
六、操作步驟：
步驟1. 試劑制備：包括試劑溶解等預處理步驟
步驟2. RT-qPCR引物/探針mix制備
步驟3. 設置qPCR程序
步驟4. 啟動程序
步驟5. 數據解讀
FAM™ 通道ROX™ 通道 說明
陽性陽性檢測到SARS-CoV-2 RNA
陽性陰性檢測到SARS-CoV-2 RNA
陰性陽性未檢測到SARS-CoV-2 RNA
陰性陰性結果無效
七、使用注意事項：
1. 使用前應認真閱讀說明書。
2. 來自不同批次的試劑不能混合。
3. 試劑盒內的試劑應始終作為一個整體溶解分裝。
4. 試劑盒應在效期內使用。
5. 每次PCR至少應設置一個陽性對照。每次PCR至少應設置一個陰性對照和/或一個無模板對照。
6. 建議在無RNA和DNA污染的條件下進行RT-PCR，以避免操作過程中DNA或非特異RNA的交叉污染。(MB公司推薦使用PCR污染祛除噴霧，英文名：PCR Clean™，貨號15-2025，預先清潔實驗環境。)
7. 盡量減少RNA樣品的凍融次數，同時避免RNA酶污染，以減少RNA降解的風險。(RNA降解會極大地限制了RT-qPCR反應的性能)。請確保高質量的完整RNA用于檢測。
8. 樣本制備過程中，注意避免其他DNA的污染，DNA的干擾也會降低qPCR的準確性。
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