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在細胞培養過程中，病原污染可以算得上是科研工作者的噩夢了。其中支原體污染更像是一個無形的殺手，時刻威脅著細胞的安全。
細菌真菌污染還有跡可循，起碼顯微鏡下能夠清晰地看到，但是支原體個子小，不易觀察，由于繁殖速度比較慢，前期感染幾乎沒有癥狀。經常稍不留意，就中了支原體的「陰招」。統計顯示，全球大約有60%左右的細胞培養存在或曾經存在過支原體污染。
那到底如何判斷細胞究竟有沒有感染支原體？今天我們就來從原理上深扒一下，網傳的肉眼判斷是否感染支原體大法到底正不正確！
支原體感染癥狀1：細胞生長緩慢甚至死亡？
被廣泛使用的細胞培養基，不僅給細胞提供支持和養分，對于支原體而言，也是天堂一般的存在。
適宜的溫度（37℃）
合適的PH（7-8之間都可生存）
充足的養分（各種氨基酸、生長因子等）
一定的二氧化碳（5%左右）
與細胞培養高度重合的培養條件，注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。
早有研究表明[1]，一些支原體（包括最為常見的人型支原體、發酵支原體、精氨酸支原體等），通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當這些支原體混入細胞培養體系后，會與細胞爭搶精氨酸，導致細胞「吃不飽飯」，出現營養不良的癥狀：生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。
如果你培養的細胞出現以下情況，基本可以確定是支原體感染了，不放心的話可以再配合支原體檢測試劑（檢測神器幫你揪出培養基中的支原體！）進一步確認。
細胞被支原體污染后的表現
①細胞生長緩慢
②細胞變形
③培養基中碎片增加
④細胞易聚團
⑤鏡下觀察有小黑點
⑥培養基提前變色
除了影響細胞活力，支原體還會給細胞帶來的幾百種基因表達的改變,包括編碼受體、離子通道、生長因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白，可以錨定在胞膜的外表面，被TLR2等免疫細胞的受體識別。激活NF-kB途徑，進一步導致細胞活化[5]，偏離最終的實驗結果。
支原體DNA抽提Kit特點及操作步驟
特點
1.符合歐洲藥典的要求。
2.從細胞上清和生物制品中，均可分離支原體DNA，全程只需30分鐘。
3.洗脫DNA純度高，體積50μl，保證PCR最大的靈敏。
操作步驟
試劑盒組分
Spin columns（核酸純化住）、Collection tubes（收集管）、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液
儲存條件
室溫
當前位置：