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培養基的滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌：
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應立即滅菌，至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時，滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長，也不能超過規定的壓力范圍，否則有機物質特別是維生素類物質就會在高溫下分解，失去營養作用，也會使培養基變質、變色，甚至難以凝固。將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包扎封口，然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。 滅菌后的培養基可放到培養室中預培養3d，若無污染現象，則證明滅菌是*的，可以使用。暫時不用的培養基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養基應在1周內用完，其他培養基最多也不要超過1個月。
2、過濾滅菌：
一些植物生長調節劑及有機物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養基一起進行高溫滅菌，而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌。細菌過濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要先進行高壓滅菌。過濾后的溶液要立即加入培養基中，若為液體培養基，可在培養基冷卻至30℃時加入；若為固體培養基，必須在培養基凝固之前（50-60℃）加入，振蕩使溶液與其他成分混合均勻。
處理細胞培養工作區域的支原體
這里的工作區域包括實驗臺、超凈臺、培養箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、門把手等細胞培養的環境。
使用德國MB公司生產的支原體祛除噴霧或濕巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分鐘清除支原體，高效快速，操作方便。
產品特點及原理：
1）快速有效
噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內迅速殺除支原體。
與傳統的化學試劑熏蒸方法相比，更加安全；與傳統酒精處理、紫外線照射方法相比更有效！
2）廣譜抗菌
不僅能去除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。
3）無腐蝕性和致癌性
乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分。
4）操作簡便
即用型消毒液，可以快速簡單地保持工作區的清潔干凈。
使用方法及步驟：
噴霧劑:
注：對于細胞培養箱，內部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后，應打開箱門通風至少1小時。如培養箱帶熱滅活功能，可開啟該功能以替代風干。
濕巾:
對于移液器，門把手，電子設備等，可使用支原體祛除濕巾。擦拭后，應讓其被消毒物體的表面保持濕潤，再讓其自然風干。
培養箱水槽和水浴鍋中預防支原體污染的方法
細胞培養環境中，培養箱水槽、水浴鍋經常會有支原體以及各種細菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時，水槽中的水源即會成為細胞污染的重要來源。
保持水槽的潔凈，對細胞培養的順利進行非常重要。
推薦全球眾多實驗室日常都在使用德國MB公司生產的Water Shield支原體污染防護劑（水槽用）。Water Shield可持續作用四周，使水源避免受到支原體、細菌、酵母、霉菌和孢子的污染。
產品特點：
1）長效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡合劑，不易揮發，可持續作用4周。
2）安全。不含醛類或疊氮化物，對細胞無毒害。
3）廣譜。預防支原體、細菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。
4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。
5）不產生水垢。
操作步驟：
1）Water Shield和蒸餾水可直接加入培養箱水槽或水浴鍋中。
2）Water Shield按1:200比例使用，例如：1000ml蒸餾水+5ml Water Shield，或10L蒸餾水+50ml Water Shield。
3）4周左右清洗水槽，換水，重新加入Water Shield。
注意事項：
避免吸入。眼睛接觸或長時間皮膚接觸可能會產生刺激性。因而，使用試劑時應戴上護目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸，應用大量水沖洗。
Water Shield對玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好
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