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污染是細胞培養技術中面臨的主要問題,細胞培養過程中一旦被支原體污染將很難清除。本文締一生物/締一生物為您分析支原體污染細胞的癥狀。
支原體污染細胞后.培養液可不發生混濁.多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著，細微變化也可由于傳代、換液而緩解.因此易被忽視。但個別嚴重者，可致細胞增殖緩慢.甚至從培養器皿脫落。
癥狀1：細胞生長緩慢甚至死亡？
被廣泛使用的細胞培養基，不僅給細胞提供支持和養分，對于支原體而言，也是天堂一般的存在。
與細胞培養高度重合的培養條件，注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。
早有研究表明[1]，一些支原體（包括為常見的人型支原體、發酵支原體、精氨酸支原體等），通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當這些支原體混入細胞培養體系后，會與細胞爭精氨酸，導致細胞「吃不飽飯」，出現營養不良的癥狀：生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。
而精氨酸又是細胞組蛋白的重要組成成分，缺乏精氨酸會嚴重影響組蛋白合成，引起染色體斷裂。再加上細胞處于長qi饑餓的狀態，終導致細胞生長變慢甚至死亡。
支原體感染癥狀2：細胞變形、碎片增加、易聚團、有小黑點？
經過支原體的這一番操作，細胞結構已經被嚴重破壞，隨之而來的就是細胞形態改變、細胞易聚團、大面積細胞凋亡制造的蛋白碎片（也就是培養基中的碎片和小黑點）
支原體也是如此——當培養體系中感染了支原體并大量繁殖的時候，會向外排放代謝產物，影響體系中的PH，加快培養基變黃的速度。
支原體感染癥狀3：培養基易變黃？
綜上所述，如果你培養的細胞出現以下情況，基本可以確定是支原體感染了，不放心的話可以再配合支原體檢測試劑（檢測神器幫你揪出培養基中的支原體！）進一步確認。
除了影響細胞活力，支原體還會給細胞帶來的幾百種基因表達的改變,包括編碼受體、離子通道、生長因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白，可以錨定在胞膜的外表面，被TLR2等免疫細胞的受體識別。激活NF-kB途徑，進一步導致細胞活化[5]，偏離終的實驗結果。
Minerva Biolabs PCR Clean™
通過中和以及降解的原理，可快速有效地祛除任何物體表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染，使它們快速的降解，從而確保PCR實驗結果的準確。
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將PCR Clean™噴在操作臺表面，反應1分鐘后，即可用干凈紙巾擦干試劑。
注：如果沒有擦拭干凈，液體揮發后表面可能有白色殘留，影響美觀。此時可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處，然后擦拭即可。
針對移液器需要去除DNA污染，可按照說明書拆開移液器，將桿軸浸泡在PCR Clean™噴霧劑中，1分鐘后取出后用水沖洗，晾干，重新組合。
PCR Clean™的優點：
1、快速：1分鐘起效。
2、方便：噴霧劑可直接使用。
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