400-166-8600400-166-8600
細胞培養是一種無菌操作技術，需要保護工作環境和條件免受微生物污染和其他不良因素的影響。其實驗室設計的原理是防止微生物污染和不良因素，需要潔凈的工作環境，新鮮空氣，干燥和無煙無塵。細胞培養室的設計原理一般是無菌操作區設計在室內活動較少的內側，常規操作和封閉培養在一個房間，進行洗滌和消毒在另一個房間里。
一.無菌操作區
（1）無菌操作區域：無菌操作區域僅限于細胞培養和其他無菌操作區域，最好與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。
理想的無菌操作室應分為三個部分：
a）更衣室——更換衣服、鞋子，穿戴帽子和面具。
b）緩沖室 -——位于更衣室和手術室之間，以確保手術室內的無菌環境，并放置恒溫培養箱和一些必要的小器械。
c）無菌手術室——專用于無菌處理、細胞培養。房間大小應適當，頂部不宜過高（不超過2.5m），以確保紫外線的有效殺菌 效果；墻壁光滑，*，方便清潔和消毒。工作臺不應靠墻放置。臺面要平滑壓塑作表面，涂漆成白色或灰色，以便于觀 察解剖結構和酚紅。
（2）凈化工作臺：操作簡單，安裝方便，占用空間小，凈化效果好。在一般細胞培養實驗室中主要使用的兩種的凈化工作臺：
a）側流或垂直式
b）外流或水平層流式。
二.孵化區
盡管該區域對無菌的要求并不比無菌區域嚴格，但它們仍然需要清潔無塵，因此它們也應放置在干擾少的區域。孵育可以在培養箱中或控制溫度的溫室中進行，相比之下溫室是費用較高，通常實驗室多采用培養箱孵育。
三.制備區
在該區域中，主要進行培養液，有關培養用液等實驗用品的制備。
四.存儲區域
主要存放各種冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養液、培養瓶等，此環境還需要清潔無塵。
五.清潔和消毒區域
清潔和消毒區域應與其他區域分開，主要用于清潔所有細胞培養容器、準備、消毒及三蒸水制造等。
細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養溫度要求也不同。
人體細胞培養的標準溫度為36.5±0.5，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡。
培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39時，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-401小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復；在40-411小時，細胞會普遍受到損傷，僅小半數有可能恢復；41-421小時，細胞受到嚴重損傷，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復可能；當溫度在43以上1小時，細胞全部死亡。
相反，溫度不低于0時，對細胞代謝雖有影響，,但并無傷害作用；把細胞放入25-35時，細胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在4數小時后，再回到37培養，細胞仍能繼續生長。
細胞代謝隨溫度降低而減慢。當溫度降至冰點以下時，細胞可因胞質結冰受損而死亡。但是，如果向培養液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如-80或-196(液氮)長期保存。
合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
氧氣參與三羧酸循環，產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。
開放培養時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中。二氧化碳既是細胞代謝產物，也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養中的主要作用在于維持培養基的pH值。
大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環境中更利于細胞生長。但有一些細胞也喜歡偏堿環境中生長，如成纖維細胞適合pH是7.4-7.6。每種細胞都有其最適pH值。
在細胞培養過程中，支原體感染發生率達到63%，因而細胞培養過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染，估計細胞培養的同學就開始犯愁了，細胞培養的老手都知道，支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后，如果不進行有效*的支原體清除，該實驗的細胞培養很難進行下去，細胞傳代3代以后狀態就急劇下滑，無法進行正常實驗，有的實驗室甚至只能指望換細胞間。那么怎樣才能有效檢測并清除支原體污染呢?
有沒有什么方法能夠簡單高效地祛除DNA污染呢？
當然有：Minerva Biolabs PCR Clean™
通過中和以及降解的原理，可快速有效地祛除任何物體表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染，使它們快速的降解，從而確保PCR實驗結果的準確。
使用方法也十分簡單：
將PCR Clean™噴在操作臺表面，反應1分鐘后，即可用干凈紙巾擦干試劑。
注：如果沒有擦拭干凈，液體揮發后表面可能有白色殘留，影響美觀。此時可用噴壺噴灑蒸餾水到白色殘留處，然后擦拭即可。
針對移液器需要去除DNA污染，可按照說明書拆開移液器，將桿軸浸泡在PCR Clean™噴霧劑中，1分鐘后取出后用水沖洗，晾干，重新組合。
當前位置：