如何避免血清中產生沉淀？

更新時間：2022-01-14 | 點擊率：892

胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

組份與比例不同：兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。

科研實驗中，細胞的體外培養一直是一個重要環節。細胞要養好，就要用好血清，如Ausbian®特級胎牛血清，它適合各種細胞培養，尤其適合難養細胞，如：干細胞、肝細胞，神經細胞，原代培養、細胞融合、轉染細胞等。

血清沉淀是什么？
血清中經常會出現肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產生的原因有很多，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。

1. 纖維蛋白（Fibrin）
血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產過程中，血清采集、過濾（3 次 0.1 μm過濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發生凝集，形成肉眼可見的沉淀。

2. 磷酸鈣（Calcium Phosphate）
這是一種常見的沉淀成分，通常會造成血清出現云霧狀渾濁。當產品在 37℃保存時，這種現象尤其明顯，在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下四處游動，常被誤認為是微生物污染。
3. 其他成分（Other）
血清中的其他成分也會形成沉淀，例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等

解凍血清時，應先將血清至于2-8℃冰箱，并經常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應按用量分裝并于-20℃保存，避免反復凍融。

按如下操作可避免沉淀的產生：

(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。

(2) 血清分裝凍存時，須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。

(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。