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細胞培養怕支原體污染，但有一些被污染的細胞不能被丟棄時該怎么辦？今天小編把上慣用的一個小絕招教給你，簡單有效！
如何祛除細胞上的支原體污染？
據研究表明，約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細胞小很多，經低速離心與細胞分離。通過反復懸浮沖洗、離心，加上使用我們的Zell Shield®，即可在細胞培養四代以內有效地祛除支原體。
什么是Zell Shield®？
Zell Shield®是一種鏈青霉素類復合抗生素，
對細胞影響很小，可以有效抑制細胞培養中的
支原體、細菌、霉菌、真菌等微生物增殖。
普通的鏈霉素、青霉素對支原體沒有效果。
那為什么Zell Shield®有效呢？
因為Zell Shield®是由Minerva公司生產的專門針對支原體的抗生素。
德國Minerva公司是由著名的羅伯特·科赫研究所中分離出來的，專注于支原體、細菌的污染控制，尤其以支原體和軍團菌的祛除、檢測而聞名。Zell Shield®是Minerva公司的一產品，不但對細胞培養中的細菌、真菌、霉菌有效，更是對支原體的祛除有確切效果。
具體是怎么操作呢？
1.首先把被支原體污染的細胞消化下來，
放入離心管離心，棄上清。
再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、
低速離心（300~500r/min）、棄上清，
反復三次。
這樣可祛除細胞表面60％~70％的支原體，
支原體還剩約30％~40％.
2.細胞加入含1％Zell Shield®的新鮮培養基，
傳代培養。
這時因培養基中Zell Shield®的抑制作用
細胞培養過程中，
雖然細胞增殖，但殘留的支原體無法增殖。
細胞需再次傳代時，把第二代細胞消化下來，
離心，棄上清。
加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，
反復三次，
這時，細胞上殘留的支原體大約已剩余為初污染量的10％左右。
3.細胞加入含1％Zell Shield®的新鮮培養基，
傳代培養。
需再次傳代時把第三代細胞消化下來，
離心，棄上清。
加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，
反復三次，
可再次祛除60％~70％的殘余支原體，
通過沖洗、抑制、換液等操作，
細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3％左右。
4.細胞加入含1％Zell Shield®的新鮮培養基，
傳代培養。
需再次傳代時把第四代細胞消化下來，
離心，棄上清。
加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，
反復三次，
可再次祛除60％~70％的支原體，
此時，支原體殘留量大約已低于1％.
支原體的增殖亦有密度要求，
用Zell Shield®處理過四代的細胞，
即便撤掉Zell Shield®，
只要保證沒有新的支原體人為再次帶入，
原有支原體也無法再增殖，
隨著傳代，換液，支原體的老化、死亡，
細胞中的支原體污染基本就*解決了。
敲黑板，劃重點啦
1.每次傳代時，重復三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要，操作要正確、規范，以達很好效果！
2.在培養基中加入1％Zell Shield®抑制支原體增殖！
3.使用安全的血清、培養基等試劑，不再有新的支原體加入！
做到以上三點即可確保祛除支原體污染。
Zell Shield®工作原理是什么？
支原體祛除劑Zell Shield®（培養基用）
是一種即用型鏈青霉素類的復合抗生素，
在培養基中1%的濃度
通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成，
抑制細胞培養中遇到的
細菌、真菌、霉菌增殖，
更可以有效、精確地抑制支原體增殖，
且對細胞基本安全。
品名：支原體祛除劑Zell Shield®（培養基用）
生產商：Minerva Biolabs GmbH
生產地：德國
貨號：13-0050
規格：50mL/瓶
儲存溫度：-18℃
使用注意事項：實驗室初次使用，注意分裝，分裝后的小包裝Zell Shield®仍-20℃避光冷凍保存，現配現用。
貨期：大多數時間國內有現貨
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