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在生物制藥領域，動物源原料存在安全風險，針對此風險，各大藥典制定了相關規范：
如《歐洲藥典》（EP8.0,2014)第5.2.8章強調了醫用產品的生產應優先考慮使用“非TSE相關動物物種材料”或“無動物源材料”，使安全風險低化。
《美國藥典》也明確規定，為減少TSE傳播的潛在風險，建議使用無動物源生產原料代替動物源原料。
在疫苗生產領域，無動物源培養基的使用不僅可以使安全風險小化，而且存在諸多優點。
疫苗生產用『無動物源』培養基的優點
生產疫苗使用的動物源細胞培養基，具有潛在的安全風險，且存在批間差異，審批手續繁瑣等問題。
而無動物源培養基有著極大地*性：
1.無動物源培養基*避免了因原材料導致接種者感染外源病毒的風險
2.防止了動物源原料帶來的病毒干擾目標病毒
3.無血清的配方，使細胞懸浮培養更容易，減少細胞成團，利于疫苗廠大規模懸浮培養
4.無動物源配方，批間差異更小，利于工業化穩定生產
5.原料無動物源成份，使疫苗審批的申報流程更簡便
6.無動物源培養基，在海關進口時，手續更簡便，保證原料更快捷地能及時供應
無動物源培養基已被疫苗生產廠家大量使用，其中一款Himedia公司研制的新型的CELLin1™培養基，更是因其應用面廣，細胞培養效果佳，病毒產量大，而表現上佳。
CELLin1™培養基適用的疫苗品種范圍
CELLin1™適用于以下疫苗生產常用的5種細胞
CELLin1™作為一種
新型『無動物源』培養基，
專門用于培養上述五種細胞，
且具有非常好的培養效果。
CELLin1™『病毒生產能力』和『促細胞生長能力』
驗證報告
1.實驗信息
本實驗使用CELLin1™無動物源培養基與競品OptiPRO™SFM (Gibco)無動物源培養基分別培養細胞。
實驗選用的細胞系：
MDBK細胞，牛皰疹病毒1型(BHV-1)
MDCK細胞，流感病毒A
PK-15細胞，豬圓環病毒2型（PCV）
Vero細胞，狂犬病毒
B.實驗觀測指標
1.病毒產生能力（96孔板內進行）
1.1生長曲線：檢測培養基維持細胞生長和達到高細胞密度和高活力的能力
1.2病毒滴度：檢測培養基支持病毒在宿主細胞內繁殖的能力
2.種子制備和細胞存儲
宿主細胞系的存儲和種子制備是病毒疫苗生產前的2個主要步驟。通過連續傳代，檢測CELLin1™支持宿主細胞生長的能力。
C.實驗結果
MDBK細胞
采用CELLin1™培養MDBK細胞，
BHV1病毒滴度用TCID50 (108）表示（下圖）。
數據表明，CELLin1™培養的細胞少反而得到了更大的病毒產量，CELLin1™培養的MDBK細胞更健康、更有活力，產毒能力更強。
MDBK細胞在T175培養瓶中，
用CELLin1™或競品培養基培養和連續傳代。
當細胞長至70-80%時進行傳代（下圖）。
CELLin1™連續五代培養的MDBK細胞數量遠高于競品，而且細胞生長更穩定。
MDCK細胞
采用CELLin1™培養MDCK細胞，
流感病毒A滴度用TCID50 (108）表示（下圖）。
數據表明，CELLin1™培養的MDCK細胞產毒能力更強。
連續五代培養，CELLin1™培養的MDCK細胞數量遠高于競品，對細胞的支持非常穩定。
PK-15細胞
采用CELLin1™培養PK-15細胞，
豬圓環病毒滴度用TCID50 (108）表示（下圖）。
數據表明，CELLin1培養基更適合PK-15細胞生長。
PK-15細胞在T175培養瓶中，
用CELLin1™或競品培養基培養和連續傳代。
當細胞長至70-80%時進行傳代（下圖）。
連續五代培養，CELLin1™培養的PK-15細胞數量均高于競品，對細胞的支持非常穩定。
Vero細胞
采用CELLin1™培養Vero細胞，
狂犬病毒滴度用TCID50（108） 表示（下圖）。
數據表明，CELLin1™培養的細胞少反而得到了更大的病毒產量。CELLin1™培養的Vero細胞更健康、更有活力，產毒能力更強。
Vero細胞在T175培養瓶中，
用CELLin1™或競品培養基培養和連續傳代。
當細胞長至70-80%時進行傳代（下圖）。
通過連續五代培養，與競品的細胞密度對比，CELLin1™對Vero細胞的支持非常穩定。
D. 結論
CELLin1™支持Vero、PK-15、MDCK、MDBK細胞生長和病毒繁殖的能力已得到了驗證。
在這些細胞系中，CELLin1™顯示出的病毒生產能力和促細胞生長能力。
因而，CELLin1™可有效的作為通用培養基用于Vero、PK-15、MDCK、MDBK細胞的病毒生產。
CELLin1™的配制方法
CELLin1™是一款化學限定的
疫苗生產用『無動物源』培養基，
分為A、B兩個部分。
A部分為基礎培養基，
呈白色至淺粉色均勻粉末，2-8 ℃避光保存。
B部分為生長添加劑，
呈無色透明溶液，-20 ℃保存.
1L規格的CELLin1™配制步驟
取11.5g A部分用900ml組織培養級別水重懸，持續攪拌直至粉末*溶解。不要加熱。
加入2.70g碳酸氫鈉粉末或36.0ml 7.5％碳酸氫鈉溶液配制1升培養基。攪拌至溶解。
加入584mg的L-谷氨酰胺粉末或加入20mL濃度為200mM的L-谷氨酰胺以制備1升培養基。攪拌至溶解。
用1mol/L的HCl或1mol/L的NaOH將pH調節至低于理想pH值0.2-0.3單位水平，因為pH值在過濾后趨于上升。
用組織培養級別水將體積補足至1000ml。
立即用孔徑≤0.22μM濾器過濾培養基以滅菌。使用正壓而非真空抽濾，以減少CO2的丟失。
在2-8℃解凍生長添加劑（B部分）。
在A部分和B部分放入生物安全柜之前，對兩部分瓶子表面噴灑異丙醇進行消毒。
在無菌條件下將B部分全部內容物轉移至1L基礎培養基（A部分）中，輕輕混合。
配置*的培養基可直接使用。儲存時，*培養基在2-8℃下的保質期為8周。
注：在使用過程中，還需要細胞的無血清馴化。
CELLin1™產品信息
品名：CELLin1™化學限定疫苗生產用無動物源成分培養基
英文名：CELLin1™ Chemically defined, Animal Component Free Virus Production medium
貨號：SFM036AP
生產商：HiMedia Laboratories
生產地：印度
組成：
A部分為基礎培養基，干粉，2-8℃保存
B部分為生長添加劑，液體，-20 ℃保存
內毒素含量：小于1EU/ml
市場價：
1L/套 ￥950
10L/套 ￥8000
廠家介紹:
HiMedia Laboratories公司是世界的培養基生產廠家。HiMedia公司總部位于印度，50年致力于微生物培養基和細胞培養基的研發生產，在制藥等工業生產中被廣泛應用，其產品行銷140多個國家。尤其是HiMedia公司的非動物源培養基，在上占地位。
HiMedia公司生產的培養基都具備
WHO GMP、ISO9001、
ISO13485質量管理體系認證
和CE、FDA注冊登記，
能更好地應用于工業化生產。
2019年，HiMedia公司的CELLin1™產品正式進入中國，由北京締一生物作為總代理。北京締一生物被中國生物界譽為值得“持續信賴的供貨商”，在細胞培養的工業化生產領域有著專業的技術背景，為國內疫苗生產（如流感疫苗，禽流感疫苗，豬藍耳疫苗等）提供了有力的幫助和支持。
現今我們引入CELLin1™給科研人員和工業藥廠，希望能幫助藥廠進一步發展，使我國疫苗生產領域能邁上一個全新的高度！
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