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牛血清是細胞培養(yǎng)基的重要組成部分，其質(zhì)量好壞對細胞狀態(tài)及數(shù)量增長速度影響很大。常用的有胎牛血清、新生牛血清及小牛血清。牛的采血年齡是這三種血清區(qū)分的顯著標志。小牛血清的采集對象是出生1年之內(nèi)的小牛，新生牛血清是出生24小時至2周內(nèi)的新生牛，胎牛血清則是6-10個月的胎牛。隨著采血年齡的增加，牛血清中的生長因子減少，抗體和補體等含量增加。因此，鑒別血清原料的采血年齡段，防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測者所面臨的一個重要問題。
有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對SP2/0細胞株培養(yǎng)效果的比較試驗，用大增殖濃度、倍增時間、克隆率等指標來推斷樣品血清的采血年齡段，其結(jié)果如下：
SP2/0細胞株為鼠骨髓瘤細胞。首先，研究人員在無菌條件下，將7個供試血清0.22μm過濾除菌，然后將供試血清按10％、8％、6％、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細胞懸液中使細胞濃度為1×104／ml。充分混勻后在96孔細胞培養(yǎng)板中每孔接種0.2ml，每個試驗樣接種8孔。每24 h記數(shù)一孔，共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細胞懸液中，將SP2／0細胞稀釋到5個／mL，分別接種到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔0.2mL，每個供試血清樣品接種48孔，一周后計數(shù)克隆生成孔數(shù)。
結(jié)果顯示，在克隆率方面，采血年齡越小，效果越好，胎牛血清培養(yǎng)的細胞克隆率為85.4%，6h新生牛血清為79.1%，6月齡小牛血清為50%。在促細胞生長效應(yīng)方面，隨著血清濃度從2%提高到10%，細胞大增殖數(shù)不斷升高，倍增時間縮短。血清濃度相同時，采血年齡約越小，細胞數(shù)高，倍增時間越短。不同年齡段的牛血清對促細胞生長效應(yīng)的影響呈現(xiàn)比較明顯的差異性。
品名：Ausbian精制新生牛血清
貨號：VS500N
批號：1712A
規(guī)格：500ml/瓶
市場價：1600元
歡樂價：800元
*活動：買10瓶送3瓶，100瓶送40瓶
上海締一生物生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清（貨號：VS500N）為澳洲進口，血源來自新西蘭出生在4天內(nèi)的新生牛。血清經(jīng)過嚴格質(zhì)控，如檢測總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等，并經(jīng)0.22m過濾和gamma射線照射，指標達標，經(jīng)廣泛使用，受到好評。
參考文獻
李倬，等.促細胞生長效應(yīng)試驗對牛血清采血年齡段判定的探討.西北民族大學(xué)學(xué)報.2003,24(3):59-66
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