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彎曲菌（Campylobacterspp.）是導(dǎo)致人類(lèi)食源性腹瀉的主要病原菌之一，其感染已成為范圍內(nèi)引起細(xì)菌性腸胃炎的主要病因。目前，彎曲菌屬已被鑒定有26個(gè)種。
空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌是彎曲菌屬中引起大多數(shù)的人類(lèi)疾病的主要菌種，由空腸彎曲菌引起超過(guò)90%人類(lèi)疾病感染，除急性腸胃炎，其感染還可并發(fā)嚴(yán)重的格林-巴利綜合征，可導(dǎo)致人呼吸肌麻痹而死亡。剩余大多數(shù)人類(lèi)疾病由結(jié)腸彎曲菌引起。
如何的檢測(cè)出空腸彎曲菌，成為了檢測(cè)人員關(guān)心的重要問(wèn)題。本文締一生物為您介紹幾種空腸彎曲菌檢測(cè)方法。
傳統(tǒng)檢測(cè)方法
根據(jù)選擇性培養(yǎng)基生長(zhǎng)特征、鏡檢和諸多生化指標(biāo)來(lái)判別。根據(jù) ISO10272-2017 方法和國(guó)標(biāo) GB 4789.9-2014 方法，空腸彎曲菌是能水解馬尿酸鹽的彎曲菌，并且是區(qū)分空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌的生化指標(biāo)。一般步驟分樣品處理、增菌與預(yù)增菌、分離、鑒定四個(gè)步驟，菌種分離是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵問(wèn)題。
分離空腸彎曲菌締一生物為您推薦使用HiMedia公司（微生物公司）彎曲菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)：M2020）進(jìn)行分離。常見(jiàn)的空腸彎曲菌分離平板為mCCDA，HiMedia在mCCDA平板上進(jìn)行改良，可支持彎曲桿菌的豐饒生長(zhǎng)，在此培養(yǎng)基中呈現(xiàn)淺紫至紫色的菌落，比通常mCCDA平板容易分離，可對(duì)食品和臨床樣品對(duì)彎曲桿菌進(jìn)行選擇性分離和鑒定。
傳統(tǒng)檢測(cè)方法具有儀器、設(shè)備要求不高，檢測(cè)成本低等優(yōu)點(diǎn)，目前仍是質(zhì)檢部門(mén)檢測(cè)彎曲菌的主要檢測(cè)方法。
免疫傳感器方法
生物傳感器是對(duì)生物物質(zhì)敏感并能將其濃度轉(zhuǎn)換為電信號(hào)等進(jìn)行檢測(cè)的儀器。它是由固定化的生物敏感材料作識(shí)別元件（包括酶、抗原、抗體、微生物、細(xì)胞、組織、核酸等生物活性物質(zhì)）、信號(hào)轉(zhuǎn)換器（如氧電極、光敏管、場(chǎng)效應(yīng)管、壓電晶體等）及信號(hào)放大裝置構(gòu)成的分析工具或系統(tǒng)組成。待測(cè)物與識(shí)別元件發(fā)生作用后，所得產(chǎn)物（光、熱等）通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵龅碾娦盘?hào)、光信號(hào)等，從而達(dá)到分析檢測(cè)物的目的。
基于生物傳感器的方法自動(dòng)化程度高，對(duì)人員的要求不高，可實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)無(wú)損檢測(cè)，但在食品基質(zhì)中的檢測(cè)效果一般。
基于質(zhì)譜的方法
基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型的用于微生物鑒定和分型的技術(shù)。其原理是用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量，樣品解吸附，基質(zhì)-樣品之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移使得樣品分子電離，電離的樣品在電場(chǎng)作用下飛過(guò)真空飛行管，通過(guò)離子的質(zhì)量電荷之比（M/Z）與離子的飛行時(shí)間成正比來(lái)分析離子，并測(cè)得樣品分子的分子量。不同的細(xì)菌經(jīng)過(guò) MALDI-TOF-MS 檢測(cè)可以形成特異性的指紋圖譜，將待測(cè)菌的指紋圖譜與已有的質(zhì)譜圖譜庫(kù)比較，即可確定細(xì)菌種屬。
基于質(zhì)譜的方法雖然快速可靠，但主要應(yīng)用于對(duì)純菌株的鑒定分型，要達(dá)到直接從樣品中分析彎曲菌菌種的目的，則需要調(diào)整試驗(yàn)策略建立一系列適合彎曲菌的重現(xiàn)性好的分析方法。
實(shí)時(shí)熒光 PCR 法
實(shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù)是將傳統(tǒng)的 PCR 擴(kuò)增和檢測(cè)相結(jié)合，在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè) PCR 進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定性定量分析的方法。根據(jù)熒光標(biāo)記方法一般分為染料法和探針?lè)ā?/span>
與傳統(tǒng)的 PCR 相比，實(shí)時(shí)熒光 PCR 方法具有特異性更強(qiáng)、靈敏度更高、自動(dòng)化程度高、有效解決 PCR 污染問(wèn)題等優(yōu)點(diǎn)，在 21 世紀(jì)初已廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域，包括彎曲菌等食源性致病菌的快速檢測(cè)中。但對(duì)人員的要求較高，也需特定的較為昂貴的儀器，使其在實(shí)際應(yīng)用中受限。
檢測(cè)空腸彎曲菌的方法很多，各有利弊，建立一個(gè)更快速簡(jiǎn)便、更穩(wěn)定可靠、更準(zhǔn)確、更低成本的彎曲菌檢測(cè)技術(shù)是保證公共衛(wèi)生和食品安全的迫切需求?？梢灶A(yù)見(jiàn)，多種檢測(cè)技術(shù)的有機(jī)結(jié)合和優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)有望解決上述需求。
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